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標題細胞培養(yǎng)學問深,免費秘籍等你拿哦!

   

提供者:上海遠慕生物科技有限公司    發(fā)布時間:2018/10/22   閱讀次數(shù):488次 >>進入該公司展臺

細胞培養(yǎng)是生命科學研究中最基礎、也是最常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗,在每一次細胞培養(yǎng)的過程中小編都是精心呵護,小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護你一世周全!可是可是̷̷無數(shù)次細胞都因污染而離我而去,投入的不只是小編貌美如花的青春,還有那一去不復返的經(jīng)費!


 

       在眾多污染物中,就屬支原體最狡猾了,他最善于隱藏自己,因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡,但會改變細胞的新陳代謝,甚至會改變細胞的基因表達譜,小編就這樣被欺騙了無數(shù)次,誰讓小編就是個看“顏值”的花癡了?墒切【幫ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗中總結(jié)出來,當你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時:生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉(zhuǎn)染效率顯著降低;細胞復蘇后存活率降低̷̷。那你就得千萬小心了,也許你的細胞已經(jīng)被支原體欺凌了!


 

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什么是支原體?

       支原體是一類能夠自我復制的最小的原核生物,直徑為0.1~0.3μm,無細胞壁,呈現(xiàn)高度多形性,有球形、桿形、絲狀和分支狀等多種形態(tài),可透過一般過濾膜且對抗生素有耐藥性,是原代細胞和傳代細胞的常見污染物。


 

支原體污染的細胞有哪些癥狀?

       細胞生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉(zhuǎn)染效率顯著降低;細胞蘇后存活率降低......然而,支原體污染的細胞不會馬上死亡,但會改變細胞的新陳代謝,甚至會改變細胞的基因表達譜......然后的然后,細胞已面目全非,不再是原來那株細胞了,嚴重時則會徹底摧毀一株細胞!隨之而來的問題就是實驗數(shù)據(jù)不重復,實驗結(jié)差,甚至實驗做不出。正常的細胞支原體污染的細胞




 

支原體污染有哪些來源?

       典型的支原體污染的來源包括細胞間交叉污染、工作環(huán)境或?qū)嶒炂鞑牡奈廴、操作者本身(一些支原體是人體的正常菌群)或無菌操作不佳、培養(yǎng)基、血清或其他試劑污染和制備細胞的原始組織或器官的污染。因為支原體污染不易被察覺,所以,定期對培養(yǎng)的細胞進行支原體污染檢測以及對環(huán)境支原體污染進行預防已經(jīng)是每個細胞培實驗室所必備的。


 

支原體檢測方法有哪些?

       目前,檢測支原體污染的方法有很多種,包括直接培養(yǎng)法、dna熒光染色法、酶學檢測法、探針法和pcr法等。其中,培養(yǎng)法需要的時間較長,敏感性較低,其敏感性依賴于培養(yǎng)基的成分和各成分含量;酶學檢測法和探針法操作較為繁瑣,涉及額外的細胞培養(yǎng)或特殊的儀器設備;dna熒光染色檢測法相對更簡單,但容易出現(xiàn)假陽性果。pcr檢測法能特異性擴增支原體dna,因高敏感性及簡單快捷的特點簡化了支原體污染的檢測流程,而被廣泛采用。


 

重點來了,細胞被支原體污染了,怎么辦?

       首先,對細胞進行支原體檢測,以確定細胞是否被支原體污染。如果,檢測結(jié)果是陰性,我們建議您做好支原體預防工作。如果,檢測結(jié)果是陽性,只要細胞能買到,我們都建議您扔掉已被支原體污染的細胞,以免污染其他細胞,同時對細胞培養(yǎng)室及周圍環(huán)境進行支原體去除處理;如果是自建細胞系,或者無法通過購買渠道獲得的,我們建議您先對細胞采取支原體去除措施,然后再采取預防策略。我們建議您不定期的對細胞培養(yǎng)室、培養(yǎng)箱、生物安全柜和超凈工作臺等處做消毒除菌處理,以防止支原體污染發(fā)生。

關鍵詞:細胞培養(yǎng)  支原體    

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