【臍靜脈平滑肌細胞】下面是細胞株培養(yǎng)的具體無菌技術要點：

1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區(qū)域應保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進行操作。

3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應當首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作，并選擇適當?shù)燃壍臒o菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。

5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預濾網(wǎng)（300小時/預濾網(wǎng)，3000小時/HEPA）。

6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【臍靜脈平滑肌細胞】齊一生物友情提醒，本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細胞說明，具體詳細請見細胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【臍靜脈平滑肌細胞】五、培養(yǎng)方法

 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：

 如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞已長滿（達 80-90%）。即可進行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內(nèi)加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、細胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

細胞培養(yǎng)代理品牌

細胞培養(yǎng)代理品牌

【臍靜脈平滑肌細胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業(yè)生產(chǎn)和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

9018162  PCB, connect, touch screen, Qsym             CNY                                  

9018123  Tool, cable, FIW ｕpdate centrifuge, QIAC          CNY                                  

9018089  Cooling adapter, Reagent holder 2, Qsym            CNY                                  

9017854  Shaker Rack Plugs (12)        CNY                                  

9017847  Shaker Rack          CNY                                  

9017801  Body, back panel, QIAC        CNY                                  

9015070  EX.UNIT, Dilutor, BR3000 (9170)              CNY                                  

9015016  Probe 0.4mm, BR8 RD         CNY                                  

950163    Final Wash Reagent (DXF) (350 ml)            CNY                                  

950067    QIAcube HT Plasticware              CNY                                  

218600    miScript Precursor Assay (100)    Primer Assays for the detection of precursor miRNAs. Each assay will be a mix of a forward ａnd a reverse stem loop specific primer for a specific precursor miRNA.    CNY                            【臍靜脈平滑肌細胞】      

218421    Human miScript Assay 96 SetVXX.X (20)          CNY                                  

9018304  EZ1 Advanced Virus Card v1.1            CNY                                  

9239547  Flag, X Stop, XY          CNY                                  

9015303  Stopper, reagent tub, left, M48             CNY                                  

9015293  Plate, magnet, M48        CNY                                  

1031240  REPLI-g Midi-Reacti.Buffer(730µl/2),KG           CNY                                  

1030058  BioSprint 15 Plasticware       26x 5-rod covers ａnd 130 x 5-tube strips for the use with BioSprint 15     CNY                                  

1027420  Premix FlexiTube siRNA              CNY                                  

9019455  Upgrade kit GD100, incl. Perm/Remove, HS              CNY                                  

9019901  Lead Screw - X, PyroQ96ID        CNY                                  

9018174  2D-Barcode reader, Qsym            CNY                                  

9018170  Worktable, body parts, Qsym              CNY                                  

9018128  Motor, z, extractor, Qsym            CNY                                  

9018093  Cooling adapter, LC capillaries 32, Qsym            CNY                                  

9017838  Rotor Key              CNY                                  

9017810  Module, centrifuge, QIAC            CNY                            【臍靜脈平滑肌細胞】      

9017802  Body, side panel, left, QIAC          CNY                                  

9017790  Belt, Y-drive, QIAC        CNY                                  

9015281  Plate, Z side, right, M48        CNY                                  

9015214  Z-Module 0.4mm Probe, BR8 RD        CNY                                  

9015187  Reagent Holders, small, M96 (10)        CNY                                  

9015182  Tip Guard, M48            CNY                                  

QYHP005       小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒                          96孔板X2                                

QYHP006       半抗原偶聯(lián)試劑盒（EDC法，500MG載體蛋白量）                     盒                                    

QYHP007       HRP抗體標記試劑盒   （優(yōu)化高碘酸鈉氧化法）                                           盒                                        

QYH01    醛固酮檢測試劑盒（血清或尿液）    Aldosterone    96孔/盒                      

QYH02    5α－雄甾－3α，17β－二醇葡萄糖醛苷酸檢測試劑盒（血清）       5a-Androstane-3a, 17b diol Glucuronide (3a-Diol G)   96孔/盒                      

QYH03    雄烯二酮檢測試劑盒（血清）    Androstenedione     96孔/盒                      

QYH04    雄烯二酮（唾液）檢測試劑盒（血清）    Androstenedione Saliva  96孔/盒                      

QYH05    抗甲狀腺過氧化物酶自身抗體（Anti-TPO）檢測試劑盒（血清）       Anti-Thyroid Peroxidase Autoantibodies (Anti-TPO)     96孔/盒                      

QYH06    抗甲狀腺球蛋白自身抗體（Anti-TG）檢測試劑盒（血清）  Anti-Thyroglobulin Autoantibodies (Anti-TG)       96孔/盒                           

QYH07    β2微球蛋白（β2M）檢測試劑盒（血清）   B2Microglobulin     96孔/盒                       【臍靜脈平滑肌細胞】

QYH08    C肽檢測試劑盒（血清）    C-Peptide       96孔/盒                      

QYH09    C反應蛋白（hs-CRP）檢測試劑盒（血清）    C-Reactive Protein (hs-CRP) 96孔/盒                      

QYH10    癌胚抗原（CEA）檢測試劑盒（血清）    Carcinoembryonic Antigen (CEA)  96孔/盒                      

QYH11    皮質醇檢測試劑盒（血清）       Cortisol   96孔/盒                      

QYH12    皮質醇（唾液）檢測試劑盒       Cortisol Saliva 96孔/盒                      

QYH13    絨毛膜促性腺激素（hCG）檢測試劑盒（血清）    Chorionic Gonadotropin (hCG)     96孔/盒                      

QYH14    脫氫表雄酮硫酸鹽（硫酸脫氫表雄酮）（DHEAS）檢測試劑盒（血清）     Dehydroepiandrosterone Sulfate (DHEAS)       96孔/盒                      

QYH15    二氫睪酮（雙氫睪酮）（DHT）檢測試劑盒（血清）     Dihydrotestosterone (DHT)   96孔/盒                      

QYH16    雌二醇檢測試劑盒（血清）       Estradiol  96孔/盒                      

QYH17    雌酮檢測試劑盒（血清）    Estrone   96孔/盒                      

QYH18    鐵蛋白檢測試劑盒（血清）       Ferritin    96孔/盒                      

QYH19    卵泡刺激素（hFSH）檢測試劑盒（血清）      Follicle Stimulating Hormone (hFSH)    96孔/盒                      

QYH20    生長激素（hGH）檢測試劑盒（血清）    Growth Hormone (hGH)       96孔/盒                      

QYH21    胰島素樣生長因子結合蛋白1（IGFBP-1）檢測試劑盒（血清）  Insulin-Like Growth Factor Binding Protein-1 (IGFBP-1)      96孔/盒                      

QYH22    促黃體生成素（hLH）檢測試劑盒（血清）     Luteinizing Hormone (hLH)   96孔/盒                      

QYH23    瘦素檢測試劑盒（血清）    Leptin     96孔/盒                       【臍靜脈平滑肌細胞】

QYH24    卵巢癌（CA125）檢測試劑盒（血清）    Ovarian Cancer (CA125)       96孔/盒                      

QYH25    孕烯醇酮檢測試劑盒（血清）    Pregnenolone  96孔/盒                      

QYH26    孕酮檢測試劑盒（血清）    Progesterone   96孔/盒                      

QYH27    孕酮（唾液）檢測試劑盒    Progesterone Saliva       96孔/盒                      

QYH28    催乳素檢測試劑盒（血清）       Prolactin  96孔/盒