【胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞總RNA】下面是細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點(diǎn)：

1. 實(shí)驗(yàn)開始前，無菌室和無菌操作臺(tái)需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺(tái)面，并且打開無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后，才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后，請將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺(tái)，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后，才能進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出，有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺(tái)面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進(jìn)行操作。

3. 小心取用無菌實(shí)驗(yàn)物品，避免細(xì)菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全，必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無菌操作臺(tái)進(jìn)行（至少是Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項(xiàng)目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時(shí)更換）。

5.3. 無菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時(shí)/HEPA）。

6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞總RNA】齊一生物友情提醒，本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細(xì)胞說明，具體詳細(xì)請見細(xì)胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細(xì)胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞總RNA】五、培養(yǎng)方法

 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況：

 如果細(xì)胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長滿（達(dá) 80-90%）。即可進(jìn)行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內(nèi)加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。

2、細(xì)胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度 80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

【胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞總RNA】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業(yè)生產(chǎn)和銷售各種生化試劑,細(xì)胞株、原代細(xì)胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品的大型化學(xué)科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

218422Mouse miScript Assay 96 SetVXX.X (20)CNY

9018306EZ1 Advanced DSP Virus CardCNY

800349BAC End-Sequencing, w/o prepCNY

9015302Stopper, reagent tub, right, M48CNY

9015295Supporters, cap seal, M48 (6)CNY

9015292O-rings, nozzles, M48 (6)CNY

9016757Appl. Pack Sequencing for Univ.PFCNY

9015321Belt, P-motor, M48CNY

133133NeXtalStock Sodium ac. pH 4.6 (200)CNY

9243231RCS, Full Agreement"

- Service response time RCS: 5 working days

- Inspection/maintenance delivery: yes, included; 1 /agreement year

- Cost coverage for repair parts: yes, included

- Cost coverage for labor: yes, included

- Cost coverage for travel: yes, included

- Replacement system provision for DML: yes, included

- Transportation cost coverage for DML: yes, included

For defect units, after customer calling QIAGEN technical service hotline before 12 am:

RCS: 

- QIAGEN shall dispatch a specialist to repair the defect instrument at customer site within 48 Hrs / 2 working days.

DML:

- A special package containing a replacement unit shall be sent to the customer within 48 Hrs / 2 working days.

- Customer shall send the defect unit to QIAGEN Regional Repair Center following the instructions attached with the packaging.   

Note: for DML owned by customer, QIAGEN Regional Repair Center will send back the repaired original unit to customers within 7-10 working days.

PC, Monitor, Heater, Shaker, Washer, Printer ａnd Votexer:

- A new unit shall be sent to customer within  7-10 working days at no extra cost

- Customer shall send the defect unit to QIAGEN for disposal

- On-site installation of PC ａnd application software is not covered by the agreement

The Preventive Maintenance (PM) service ensures the correct operation of the equipment. During the PM, all the instrument modules are inspected by a qualified QIAGEN service technician. The Preventive Maintenance is performed under the manufacturer guidelines ａnd documented according to GLP / GMP"CNY

36113Ni-NTA Magnetic Agarose Beads (6 x 1 ml)6 x 1 ml nickel-charged magnetic agarose beads (5% suspension)CNY

950207Reagent Pack, VXThe Reagent Pack, VX, which is used together with the Virus Plasticware Pack, QIAxtractor (#950047) provides fully automated viral nucleic acid purification on the QIAxtractor. The combination of reagents ａnd plasticware enables purification of viral nucleic acids from liquid samples, with a throughput of 8-96 samples per run.CNY

9018299EZ1 Advanced DNA Dried Blood CardCNY

9239543Assy, XY, Slotted Optical Switch 1CNY

9015299Motor, P/M, M48CNY

9015294Plate, ｄrop catcher, M48CNY

132981NeXtal Stock Kit Cryo24 x 10 ml tubes containing a selection of cryoprotectantsCNY

9016755Appl. Pack Genotyping for Univ.PFCNY

9019453Front label incl. cutout for  P/R, HSCNY

9019450IC PIC, programmed , HSCNY

9014276Positioning plateCNY

9019906Seal - VPT Filter probes, PyroQ24VWCNY

9019905Insert VPT, PyroQ24VWCNY

9018155Sensor, bottle, waste drawer, QsymCNY

9018147Consumable drawer, QsymCNY

9018144Cable, heated shaker, QsymCNY

9018090Cooling adapter, Reagent holder 1, QsymCNY

9018068Kit, fuse, QsymCNY