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產(chǎn)品展示

Worthington來自牛奶的乳過氧化物酶的特征及測定

點擊次數(shù):0發(fā)布時間:2022/7/22 16:29:26

Worthington來自牛奶的乳過氧化物酶的特征及測定

更新日期:2022/7/22 16:29:26

所 在 地:中國大陸

產(chǎn)品型號:

簡單介紹:Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。

相關(guān)標簽:Worthington 

優(yōu)質(zhì)供應

詳細內(nèi)容

 牛乳酶與牛淚腺和唾液腺中形成的酶相同(Morrison等人,1965;和 Morrison  Allen,1963)。LPO 可能對控制細菌菌群很重要(Bjorck等人,1970;Gothefors  Marklund,1975;以及 Morrison  Allen,1966)。LPO 可用于用放射性碘標記蛋白質(zhì)(Gow  Wardlaw 1975Holohan等人1973;Morrison  Bayse 1973Bayse等人. 1972;弗朗茨和特金頓 1972;和馬卡洛尼斯 1969 年)。對于膜研究,大 LPO 分子限制了對暴露表面的標記。Poduslo  Braun (1975) 報告了髓鞘膜蛋白的形貌。Shin  Carraway (1974)  Phillips  Morrison (1971) 報告了紅細胞和 Nachman等人。(1973)關(guān)于血小板膜。Haustein (1975) 研究了淋巴瘤細胞和 Huber等人的細胞表面蛋白。(1975)線粒體膜。Arntzen等人報道了葉綠體膜。(1974)。Jone and Hager (1976)  Hogg (1974) 比較了正常細胞和轉(zhuǎn)化細胞的膜蛋白。固定化 LPO 也被證明是有趣的 (Johnson et al . 1975; Karonen et al .. 1975;和大衛(wèi) 1972)。

 

乳過氧化物酶 (LPO) 是種帶有血紅素輔基的糖蛋白,可以作為兩種同工酶的混合物出現(xiàn)。它的分子量為 77,500 道爾頓。LPO催化碘化物的過氧化氫氧化反應如下:

 

2I - + H 2 O 2 + 2H + → I 2 + 2H 2 O。

 

碘化物直接與血紅素基團反應;在加入 H 2 O 2后,絡合物碘化底物。LPO受肼抑制。檢測程序已從 Morrison 的程序更新為基于 ABTS ® /H 2 O 2的方法,具有更高的靈敏度和重現(xiàn)性。

 

單位定義:個單位在 25°CpH 6.0 下每分鐘減少 微摩爾過氧化氫。注意:此單位定義基于種新的測定方法。以的方法產(chǎn)生了大約 2.8 倍的結(jié)果。

 

艾美捷 Worthington 來自牛奶的乳過氧化物酶的特征

分子量:77,500 (Rombauts et al . 1967)。

 

組成:LPO 是種糖蛋白,每個分子具有個單的血紅素輔基(Hultquist 和 Morrison,1963)。它可能由兩種同工酶組成(Rombauts等人1967;Morrison等人1957;以及 Polis 和 Schmukler,1953)。另見 Morrison 和 Hultquist (1963)

 

純度指數(shù):A 412 /A 280 = 0.93-0.96 Allen 和 Morrison 1963)。

 

消光系數(shù):消光系數(shù)= 13.9。

 

艾美捷 Worthington乳過氧化物酶活性

LPO 與其他過氧化物酶樣,在 H 2 O 2存在下催化許多酚和芳香胺(連苯三酚、抗壞血酸、愈創(chuàng)木酚等)的氧化。參見 Morrison (1970) 第 657 頁以比較各種過氧化物酶的比活性,還有 Maguire 和 Dunford (1971)Morrison 和 Bayse (1973) 指出,碘化物直接與血紅素基團反應,然后在加入 H 2 O 2時,配合物碘化底物。貝斯等人。(1972) 和 Morrison 和 Bayse (1970) 報告了碘化動力學。Chung 和 Wood (1970) 報告了硫氰酸鹽的氧化,Maguire 和 Dunford (1972) 報告了碘化物的氧化。

 

抑制劑:LPO 被肼抑制 (Allison et al . 1973)。多爾曼等人。(1968) 報告了qing化物抑制的動力學。

 

艾美捷Worthington乳過氧化物酶的測定:

方法:測定程序是對 Morrison (1970) 描述的程序的輕微修改。反應速度通過測量由三碘化物產(chǎn)生引起的A 350的增加來確定。在指定條件下,在 25°和 pH 7.0 條件下,個單位每分鐘會形成 微摩爾三碘化物。

 

試劑:

0.033 M 磷酸鈉緩沖液 pH 7.0

磷酸鹽緩沖液中的 0.005 M 碘化鉀

0.090 M 過氧化氫。用試劑水將 0.1 ml 過氧化氫(Merck Superoxol 或等效物)稀釋至 10 ml

 

酶:

1 mg/ml 溶解在磷酸鹽緩沖液中。臨用,在磷酸鹽緩沖液中進步稀釋以獲得 0.02-0.04 ΔA/分鐘的速率。

 

程序:

將分光光度計設置為 25°和 350 nm。通過用 0.005 M 碘化鉀將 0.15 ml 0.090 M 過氧化氫稀釋至 30 ml 來制備反應混合物。在室溫下儲存不超過 30 分鐘。將 3.0 ml 反應混合物移入比色皿中,并在 25°下孵育 3-4 分鐘以達到溫度平衡并建立空白率(如果有)。加入 0.01 ml 稀釋酶并記錄 A 350中 3-4 分鐘的增加。從曲線的初始線性部分計算 ΔA 350 /分鐘。反應保持線性不超過 1-2 分鐘。

 

計算:

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。

來源:https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml

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