產(chǎn)品展示
Worthington來自牛奶的乳過氧化物酶的特征及測定
點擊次數(shù):0發(fā)布時間:2022/7/22 16:29:26
更新日期:2022/7/22 16:29:26
所 在 地:中國大陸
產(chǎn)品型號:
優(yōu)質(zhì)供應
詳細內(nèi)容
乳過氧化物酶 (LPO) 是種帶有血紅素輔基的糖蛋白,可以作為兩種同工酶的混合物出現(xiàn)。它的分子量為 77,500 道爾頓。LPO催化碘化物的過氧化氫氧化反應如下:
2I - + H 2 O 2 + 2H + → I 2 + 2H 2 O。
碘化物直接與血紅素基團反應;在加入 H 2 O 2后,絡合物碘化底物。LPO受肼抑制。檢測程序已從 Morrison 的程序更新為基于 ABTS ® /H 2 O 2的方法,具有更高的靈敏度和重現(xiàn)性。
單位定義:個單位在 25°C、pH 6.0 下每分鐘減少 1 微摩爾過氧化氫。注意:此單位定義基于種新的測定方法。以的方法產(chǎn)生了大約 2.8 倍的結(jié)果。
艾美捷 Worthington 來自牛奶的乳過氧化物酶的特征:
分子量:77,500 (Rombauts et al . 1967)。
組成:LPO 是種糖蛋白,每個分子具有個單的血紅素輔基(Hultquist 和 Morrison,1963)。它可能由兩種同工酶組成(Rombauts等人1967;Morrison等人1957;以及 Polis 和 Schmukler,1953)。另見 Morrison 和 Hultquist (1963)。
純度指數(shù):A 412 /A 280 = 0.93-0.96 Allen 和 Morrison 1963)。
消光系數(shù):消光系數(shù)= 13.9。
艾美捷 Worthington乳過氧化物酶活性:
LPO 與其他過氧化物酶樣,在 H 2 O 2存在下催化許多酚和芳香胺(連苯三酚、抗壞血酸、愈創(chuàng)木酚等)的氧化。參見 Morrison (1970) 第 657 頁以比較各種過氧化物酶的比活性,還有 Maguire 和 Dunford (1971)。Morrison 和 Bayse (1973) 指出,碘化物直接與血紅素基團反應,然后在加入 H 2 O 2時,配合物碘化底物。貝斯等人。(1972) 和 Morrison 和 Bayse (1970) 報告了碘化動力學。Chung 和 Wood (1970) 報告了硫氰酸鹽的氧化,Maguire 和 Dunford (1972) 報告了碘化物的氧化。
抑制劑:LPO 被肼抑制 (Allison et al . 1973)。多爾曼等人。(1968) 報告了qing化物抑制的動力學。
艾美捷Worthington乳過氧化物酶的測定:
方法:測定程序是對 Morrison (1970) 描述的程序的輕微修改。反應速度通過測量由三碘化物產(chǎn)生引起的A 350的增加來確定。在指定條件下,在 25°C 和 pH 7.0 條件下,個單位每分鐘會形成 1 微摩爾三碘化物。
試劑:
0.033 M 磷酸鈉緩沖液 pH 7.0
磷酸鹽緩沖液中的 0.005 M 碘化鉀
0.090 M 過氧化氫。用試劑水將 0.1 ml 過氧化氫(Merck Superoxol 或等效物)稀釋至 10 ml。
酶:
以1 mg/ml 溶解在磷酸鹽緩沖液中。臨用,在磷酸鹽緩沖液中進步稀釋以獲得 0.02-0.04 ΔA/分鐘的速率。
程序:
將分光光度計設置為 25°C 和 350 nm。通過用 0.005 M 碘化鉀將 0.15 ml 0.090 M 過氧化氫稀釋至 30 ml 來制備反應混合物。在室溫下儲存不超過 30 分鐘。將 3.0 ml 反應混合物移入比色皿中,并在 25°C 下孵育 3-4 分鐘以達到溫度平衡并建立空白率(如果有)。加入 0.01 ml 稀釋酶并記錄 A 350中 3-4 分鐘的增加。從曲線的初始線性部分計算 ΔA 350 /分鐘。反應保持線性不超過 1-2 分鐘。
計算:
Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。