ELISA酶聯(lián)法試劑盒操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

首先齊一生物優(yōu)質(zhì)的試劑盒，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠必要條件。所以ELISA試劑盒的購買，試劑質(zhì)量的保證以及實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)儀器的檢察都是很有重要性的。保證實(shí)驗(yàn)材料的質(zhì)量之后要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【人妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)ELISA試劑盒】齊一生物ELISA試劑盒

1.精心挑選的進(jìn)口抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、顯色劑和酶標(biāo)板全部為進(jìn)口產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)*佳性能；

2.原材料批量進(jìn)口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質(zhì)產(chǎn)品性能的同時(shí)兼顧成本；

3.采用技術(shù)，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn)；

4.預(yù)包被微孔板的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于10 ％；

5.經(jīng)過嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測試及穩(wěn)定性試驗(yàn)；

6.明確的敏感度；

7.針對所有樣品類型達(dá)到*佳的性能；

8.廣泛的檢測范圍可以滿足大多數(shù)檢測要求；

9.完善的售后服務(wù)和免費(fèi)的技術(shù)支持免去您的后顧之憂；

10.強(qiáng)大的生產(chǎn)能力和充足的儲備、操作熟練的技術(shù)人員及高效的生產(chǎn)流程，隨時(shí)可以組裝出您定制的產(chǎn)品。

【人妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)ELISA試劑盒】齊一生物僅供實(shí)驗(yàn)人、大鼠、小鼠、兔等動物實(shí)驗(yàn)標(biāo)本檢測使用！得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明！齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

ELISA試劑盒問題描述

標(biāo)準(zhǔn)曲線梯度差：

吸液或加液不準(zhǔn)請檢查移液器及吸頭

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確溶解標(biāo)準(zhǔn)品稍微旋轉(zhuǎn)瓶身，輕輕混勻使粉末完全溶解

洗滌不完全保證洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量

顯色很弱或無色：

孵育時(shí)間太短保證充足的孵育時(shí)間

實(shí)驗(yàn)溫度不正確使用推薦的實(shí)驗(yàn)溫度

試劑體積不夠或漏加、稀釋不正確檢查吸液及加液過程，保證所有試劑按順序足量添加

讀數(shù)數(shù)值低：

酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 在酶標(biāo)儀上檢查波長及濾光片設(shè)置

提前打開酶標(biāo)儀預(yù)熱：變異系數(shù)大加液不正確檢查加液情況

【人妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)ELISA試劑盒】背景值高：

檢測抗體的工作濃度使用推薦的稀釋倍數(shù)

酶標(biāo)板洗滌不完全重新閱讀操作手冊，保證清洗完全；如果用自動洗板機(jī)，請檢查所有的出口是否有堵塞

洗液有污染配制新鮮的洗液

靈敏度低：

ELISA試劑盒保存按說明書要求保存相關(guān)試劑

讀數(shù)前未終止OD讀數(shù)前應(yīng)在每孔中加入終止液

齊一生物客戶寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況：

1、標(biāo)本編號；2、所測項(xiàng)目；3、是否做復(fù)孔；3、聯(lián)系方式；4、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。

客戶必知：

客戶應(yīng)對所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。

試劑盒樣本要求

在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測，對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的標(biāo)本，及時(shí)儲存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集�?biāo)本，請?jiān)炷Ｈ〔暮�，將�?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。具體操作注意事項(xiàng)請與我司技術(shù)人員溝通。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【人妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)ELISA試劑盒】液體類標(biāo)本：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。

3. 尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞:檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

7. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

9.如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解

凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

QY-x20Hce-8693盲腸腺癌細(xì)胞未分化

QY-x21HEL299紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 CCL-137

QY-x22CW-2結(jié)腸腺癌細(xì)胞

QY-x23A-375 [A375]惡性黑色素瘤細(xì)胞 CRL-1619

QY-x24COLO-320結(jié)腸腺癌細(xì)胞

QY-x25A172膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 CRL-1620

QY-x26SW480 [SW-480]結(jié)腸癌細(xì)胞 CCL-228

QY-x27SHG-44膠質(zhì)瘤細(xì)胞

QY-x28Caco-2結(jié)腸腺癌細(xì)胞 HTB-37

QY-x29Caco-2結(jié)腸腺癌細(xì)胞 HTB-37

QY-x30U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞

QY-x31LS 174T結(jié)腸腺癌細(xì)胞 CL-188

QY-x32SK-N-MC神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 HTB-10

QY-x33SK-N-MC神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 HTB-10

QY-x34BxPC-3原位胰腺腺癌細(xì)胞 CRL-1687

QY-x35BxPC-3原位胰腺腺癌細(xì)胞 CRL-1687

QY-x36KP-N-NS腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞腦轉(zhuǎn)移

QY-x37AsPC-1轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 CRL-1682

QY-x38AsPC-1轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 CRL-1682

QY-x39U-2 OS骨肉瘤細(xì)胞 HTB-96

QY-x40U-2 OS骨肉瘤細(xì)胞 HTB-96

QY-x41GBC-SD膽囊癌細(xì)胞

QY-x42RD惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 CCL-136

QY-x43RD惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 CCL-136

QY-x44HCCC-9810膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞

QY-x45A-673橫紋肌瘤細(xì)胞 CRL-1598

QY-x46SMMC-7721肝癌細(xì)胞

QY-x47SMC-1胸膜細(xì)胞瘤

QY-x48QGY-7703肝癌細(xì)胞

QY-x49NCI-H446 [H446]小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 HTB-171