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技術文章

不含EDTA的cOmplete™ Mini蛋白酶抑制劑混合物

點擊次數(shù):40 發(fā)布時間:2024/7/30 11:03:59
  

一般描述

不含EDTA的cOmplete Mini蛋白酶抑制劑片劑可抑制廣泛的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶。與其他cOmplete片劑相比,它們不含EDTA,可保持金屬依賴性蛋白質的穩(wěn)定性和功能不受影響。利用IMAC(固相金屬親和色譜)進行的多聚His標簽融合蛋白親和純化也得到了簡化(無需透析)。
由于優(yōu)化了片劑的成分,它們對絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶具有抑制作用,并且非常適合保護從動物組織、植物、酵母和細菌中分離的蛋白質。不含EDTA的cOmplete Mini片劑同時含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制劑。金屬蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶不受抑制。

不含EDTA的cOmplete Mini片劑與cOmplete Mini片劑相同,區(qū)別是不包含EDTA或其他螯合劑(例如 EGTA)。

特異性

用于抑制絲氨酸、半胱氨酸,但不用于抑制金屬蛋白酶。

應用

不含EDTA的cOmplete蛋白酶抑制劑混合物(微型)可用作以下組分
  • 用于從列腺癌細胞系制備核裂解液,以免疫沉淀染色質和RNA的重懸緩沖液[1]
  • 用于從神經(jīng)球提取蛋白,用于蛋白質印跡分析的重懸緩沖液[2]
  • 用于從大鼠左心室提取蛋白質的均質緩沖液,以及人胚胎腎293(HEK293)細胞的免疫沉淀緩沖液[3]
不含EDTA的cOmplete蛋白酶抑制劑混合物(微型)能有效抑制細菌、酵母、植物和動物細胞提取物中的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶。[4][5][6][7]
不含EDTA的cOmplete片劑(微型)用于抑制少量(多10 ml)的蛋白水解活性,其中EDTA可能干擾蛋白質穩(wěn)定性(例如,含金屬的蛋白質)或隨后的檢測。由于EDTA干擾IMAC(固定化金屬親和層析),因此不含EDTA的cOmplete(微型)優(yōu)先用于多組氨酸標記的融合蛋白的分離過程。
如果需要抑制較大體積的(多50 ml)蛋白水解活性,我們建議使用不含EDTA的cOmplete(微型)。

特點和優(yōu)勢

使用cOmplete Mini蛋白酶抑制劑片劑可以保護蛋白質以免被廣泛的蛋白酶降解。在短短幾分鐘內,不受抑制的蛋白酶水解活性即可降解您花費數(shù)天分離的蛋白質。這些方便的水溶性片劑各自含有蛋白酶抑制劑的混合物,能抑制大多數(shù)細胞類型(包括動物、植物、酵母和細菌)的蛋白酶水解活性。不需要稱重或測量就能確保一致的結果。

  • 易于使用:只需將速溶片加入到您的緩沖液中即可。
  • 安全性: 選擇對您或您周圍的人沒有任何風險的無毒抑制劑。
  • 完善的保護: 立即保護您的蛋白質免受廣泛的蛋白酶的降解。
  • 靈活性:保護幾乎任何組織或細胞提取物中的蛋白質,包括動物、植物、酵母、細菌或真菌。

組分

幾種蛋白酶抑制劑的有混合物。

質量

用胰腺提取物進行性能測試。

外形

片劑保存在玻璃瓶中

制備說明

工作濃度:每10 ml提取液加入1片
工作溶液:制備工作溶液

一片不含EDTA的cOmplete Mini片劑足以抑制10 ml提取溶液中的蛋白水解活性。當?shù)鞍姿饣钚苑浅8邥r,應每7 ml提取緩沖液使用一片。片劑可以直接加到提取溶液中。也可制備儲備溶液(7X濃度)。

儲備溶液(7X濃度)

將一片不含EDTA的cOmplete片劑溶于1.5 ml蒸餾水或1.5 ml 100mM磷酸鹽緩沖液(pH7.0)。
儲存條件(工作溶液):儲備溶液可以在2至8℃下儲存1至2周,或在-15至-25℃下儲存至少12周。

重懸

溶于水性緩沖液,或直接添加到提取溶液中。也可采用1.5 ml水或100mM磷酸鹽緩沖液(pH7.0)制備7×儲備溶液。儲備溶液可在2至8℃下穩(wěn)定保存1-2周或在-15至-25℃下穩(wěn)定保存至少12周;在15至25℃下可以在含硫醇的溶液中使用。

法律信息

cOmplete is a trademark of Roche

原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司

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