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技術文章

二脫氧核苷三磷酸套裝 Sequencing Grade, sodium salt

點擊次數:52 發(fā)布時間:2024/7/29 11:40:33
 

Molecular Biology

質量水平

檢測方案

≤1.5% (ddNDP, HPLC)
≥98% (ddNTP, HPLC)

形式

liquid

包裝

pkg of 4 × 100 μL (4 x 1 μmol; 10 mM, each)

制造商/商品名稱

Roche

顏色

colorless

溶解性

water: miscible

運輸

dry ice

儲存溫度

−20°C (−15°C to −25°C)

一般描述

雙脫氧核苷三磷酸套裝、測序及鈉鹽溶液由高純度的雙脫氧核苷酸組成(ddNTP HPLC,面積 %≥98%;ddNDP HPLC,面積 %≤1.5%),門生產并檢測用于測序反應。該套件包含 4 瓶 ddATP、ddCTP、ddGTP 和 ddTTP,每瓶 10 mM,為澄清、無色的鈉鹽溶液 (pH 8.3)。

應用

2′,3′-雙脫氧核苷三磷酸抑制 DNA 聚合酶(,Klenow 酶)催化的給定引物的鏈延長,因此根據 Sanger(Sanger,F. 等人,(1977 年) PNAS USA 74, 5463)用于 DNA 測序。
通過在各反應中加入充當鏈終止體的雙脫氧核苷酸實現測序。設置 4 個反應,每個反應含有相同的模板和引物,以及對 a、C、G 或 T 有特異性的鏈終止子,因為只包括少量的鏈終止子,所以摻入新的 DNA 鏈是隨機事件。因此,每一個反應都會產生一系列的片段,每條 DNA 鏈都會終止于同一類型的堿基(a、C、G 或 T)。

包裝

該套件包含 4 瓶 ddATP、ddCTP、ddGTP 和 ddTTP,每瓶 10 mM,為澄清、無色的鈉鹽溶液 (pH 8.3)。

質量

測定每批雙脫氧核苷酸溶液在測序反應中的功能。
根據現行質量控制程序檢測是否存在污染的脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶和切口活性。

制備說明

活化劑:Mg2+, Co2+ 和 Mn2+ 離子
工作溶液:終末混合物的制備
在制備終末混合物之,用水將適當體積的各雙脫氧核苷酸稀釋至 10 μM 濃度。

原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司

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