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兔TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子2(TAF2)ELISA試劑盒

點(diǎn)擊次數(shù):23 發(fā)布時(shí)間:2024/2/20 14:10:00

                                 

 

兔TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子2(TAF2)ELISA試劑盒 29

實(shí)驗(yàn)原理

 

    ELISA運(yùn)用了學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色原理,需要將抗原或預(yù)包被在固相載體表面,使后來形成的抗原--酶 (熒光基團(tuán)) -底物復(fù)合物黏附在載體上,通過檢測(cè)OD值或發(fā)光值,來檢測(cè)靶蛋白的含量。

 

 

酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物域中的抗原或檢測(cè)。其操作步驟如下:1.包被:將抗原或與酶結(jié)合,形成酶標(biāo)抗原或,并固定在固相載體上。2.洗滌:去除未結(jié)合的和雜質(zhì)。3.封閉:加入封閉液,封閉固相載體上未結(jié)合的位點(diǎn),以非特結(jié)合。4.洗滌:去除未結(jié)合的封閉液和雜質(zhì)。5.加樣:加入待檢測(cè)的樣本,使其與固相載體上的抗原或結(jié)合。6.洗滌:去除未結(jié)合的樣本和雜質(zhì)。7.加入酶標(biāo):使固相載體上的抗原或與酶標(biāo)結(jié)合,將抗原或間接標(biāo)記上酶。8.洗滌:去除未結(jié)合的酶標(biāo)和雜質(zhì)。9.顯色:加入底物,使酶催化底物生成有色產(chǎn)物,根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行抗原或的定性或定量檢測(cè)。需要注意的是,具體的操作步驟可能因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)、試劑品牌等不同而有所差異。在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)手冊(cè)進(jìn)行操作,控制好實(shí)驗(yàn)條件和操作步驟,以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

酶聯(lián)吸附法(ELISA)的原理是利用抗原或與酶的結(jié)合,形成酶標(biāo)抗原或,保持其活性,同時(shí)又保留酶的活性。將抗原或與酶連接成酶標(biāo)記抗原或,它既保留了活性,又保留了酶的活性;在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(含待測(cè)或抗原)和酶標(biāo)抗原或按一定程序與結(jié)合在固相載體表面的抗原或起反應(yīng)形成固相化抗原-酶復(fù)合物,用洗滌的使固相載體上形成的抗原-酶復(fù)合物與其它成分分離,結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的量成一定的比例,加入酶反應(yīng)的底物后,底物被固相載體上的酶催化生為有色產(chǎn)物,通過定性或定量檢測(cè)有色產(chǎn)物的量即可確定樣品中待測(cè)的含量。

 

 

 

 

酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物域中的抗原或檢測(cè)。其使用范圍包括:1.臨床診斷:ELISA可以用于檢測(cè)傳染。ㄈ纭⒌龋、標(biāo)志物等,協(xié)助進(jìn)行診斷。2.食品安全:ELISA可以用于檢測(cè)食品中的有害(如殘留、獸藥殘留等),保障食品安全。3.監(jiān)測(cè):ELISA可以用于評(píng)估水質(zhì)、空氣等指標(biāo),監(jiān)測(cè)狀況。4.生物分子檢測(cè):ELISA可以用于檢測(cè)生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,在生物醫(yī)學(xué)研究域廣泛應(yīng)用?傊,酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學(xué)、生物域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,是臨床診斷和中重要的輔助手段。

ELISA90分鐘一步法的優(yōu)點(diǎn)主要包括:1.操作簡(jiǎn)單:該只需要一步操作即可完成,操作簡(jiǎn)單明了,易于。2.快速:ELISA90分鐘一步法可以在短時(shí)間內(nèi)完成,適合于大批量樣品的快速檢測(cè)。3.特高:該采用特定的或抗原進(jìn)行固定和檢測(cè),因此具有較高的特。4.靈敏度高:ELISA90分鐘一步法具有較高的靈敏度,可以檢測(cè)出較低濃度的抗原或。5.重復(fù)性好:該的重復(fù)性,結(jié)果較為。6.安全性高:ELISA90分鐘一步法不使用放射性同位素等有害,因此具有較高的安全性。需要注意的是,ELISA90分鐘一步法也存在一些缺點(diǎn),例如可能會(huì)受到非特因素的影響,結(jié)果不準(zhǔn)確。此外,該的試劑成本較高,不適合于小規(guī)模樣品的檢測(cè)。

 操作步驟

 

1. 工作:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘,使試劑盒恢復(fù)至室溫。同時(shí)好實(shí)驗(yàn)所需的材料和。2. 加樣:在酶標(biāo)板的弟1個(gè)孔中加入品50μL,然后在后續(xù)的孔中依次加入待測(cè)樣本50μL。3. 溫育:將酶標(biāo)板密封,在37℃下溫育30分鐘。4. 洗滌:用洗滌液清洗酶標(biāo)板,共洗滌5次。每次洗滌后,用吸水紙輕輕吸干孔內(nèi)。5. 加酶:在每個(gè)孔中加入酶標(biāo)物100μL。6. 溫育:再次將酶標(biāo)板密封,在37℃下溫育30分鐘。7. 洗滌:用洗滌液清洗酶標(biāo)板,共洗滌5次。每次洗滌后,用吸水紙輕輕吸干孔內(nèi)。8. 加底物:在每個(gè)孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 終止反應(yīng):在每個(gè)孔中加入終止液50μL。10. 檢測(cè):用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下讀取各孔的吸光度(OD值)。

兔TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子2(TAF2)ELISA試劑盒 29

結(jié)果分析

根據(jù)品和樣本的OD值,繪制曲線,從而計(jì)算出樣本中角蛋白1(KRT1)的濃度。具體分析可參劑盒說明書或相關(guān)文獻(xiàn)。

 

注意事項(xiàng)

1. 在操作中,應(yīng)保持酶標(biāo)板的干燥,避免水分進(jìn)入孔內(nèi)。2. 加樣時(shí)需確保加樣準(zhǔn)確、無氣泡產(chǎn)生。3. 溫育和洗滌中需嚴(yán)格控制時(shí)間和溫度,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。4. 在使用酶標(biāo)儀讀取OD值時(shí),需確保波長(zhǎng)設(shè)置正確,避免誤差產(chǎn)生。5. 在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中,需保持操作的清潔和整潔,避免交叉污染。

 

原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司

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