使用說明書

試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被白蛋白（ALB）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

間接ELISA：本法主要用于檢測。（DVH）的ELISA為例，間接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液；② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗、陰性及陽性DVH參考；待檢鴨；③ ELISA檢測儀、加樣器、聚微量板。⑵ 步驟① 加抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時，洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo) → 37℃ 2小時，洗滌三次、拋干④ 加底物液　→ 37℃ 30分鐘，加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值，并計算出P/N比值。⑶ 結(jié)果判定　已知陽性與已知陰性的比值（P/N）≥2.1，而且已知陽性的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下，如果待檢與已知陰性的比值（P/N）≥2.1，而且待檢的OD值≥0.4，則判為陽性，否則判為陰性。

樣品收集、處理及保存

2.  ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

4.  組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

3. 37℃恒溫箱

間接ELISA：本法主要用于檢測。（DVH）的ELISA為例，間接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液；② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗、陰性及陽性DVH參考；待檢鴨；③ ELISA檢測儀、加樣器、聚微量板。⑵ 步驟① 加抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時，洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo) → 37℃ 2小時，洗滌三次、拋干④ 加底物液　→ 37℃ 30分鐘，加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值，并計算出P/N比值。⑶ 結(jié)果判定　已知陽性與已知陰性的比值（P/N）≥2.1，而且已知陽性的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下，如果待檢與已知陰性的比值（P/N）≥2.1，而且待檢的OD值≥0.4，則判為陽性，否則判為陰性。

雞環(huán)腺苷二核糖水解酶(cADPRH/CD38)ELISA試劑盒

操作注意事項

2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

試劑的

洗板

2.  自動洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

5.  棄去，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

 繪制曲線：在Excel工作表中，以品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

免責(zé)聲明：試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。嚴(yán)格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。

試劑盒性能

2.  靈敏度檢測濃度小于1.0 mg/mL。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

6.  有效期：6個月

免責(zé)聲明

2.   嚴(yán)格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司