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雞過(guò)氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)ELISA試劑盒

雞過(guò)氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)ELISA試劑盒
辣根過(guò)氧化物酶:過(guò)氧化物酶(HRP)廣泛分布于植物中,辣根中含,從辣根中提取的稱辣根過(guò)氧化物酶(HRP),是由無(wú)色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構(gòu)成的一種糖蛋白(含糖量18%),分子量約40 000,約由300個(gè)酸組成,等電點(diǎn)為pH 3-9,催化反應(yīng)的適pH值因供氫體不同而稍有差異,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的銨溶液。酶蛋白和輔基吸收光譜分別為275nm和403nm。
雞過(guò)氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)ELISA試劑盒
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或既保留其學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與中的其他分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定達(dá)到很高的度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定。
一、、靈敏、特異的;二、的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相載體;四、適用、、組織勻漿液、細(xì)胞上清液、等等多種標(biāo)本類型;五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為29.8mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
標(biāo)記:良好的酶結(jié)合物取決于兩個(gè)條件:即價(jià)的和高活性的酶。的活性和純度對(duì)制備標(biāo)記至關(guān)重要,因?yàn)樘胤磻?yīng)隨活性和純度的而增強(qiáng)。在酶標(biāo)記中,的活性有所,故需要純度高、效及抗原親和力強(qiáng)的球蛋白使用親和層析提純的,可性,而且可稀釋使用,非特吸附。
雙夾心ELISA:此法與雙夾心ELISA的主要區(qū)別在于:它是采用酶標(biāo)抗檢查多種大分子抗原,它不僅不必標(biāo)記每一種,還可試驗(yàn)的性。此法的基本程序?yàn)椋孩?加(Ab-1)包被 → 4℃過(guò)夜,洗滌三次、拋干② 加待檢抗原(Ag) → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干③ 加用非同種動(dòng)物生產(chǎn)的特(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干④ 加入酶標(biāo)抗Ab-2(AB-3)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液⑥ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司