衍生的原理及柱后衍生的特點
衍生化的定義
衍生化是一種利用化學變換把化合物轉(zhuǎn)化成類似化學結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。
一般來說,一個特定功能的化合物參與衍生反應,溶解度,沸點,熔點,聚集態(tài)或化學成分會產(chǎn)生偏離。由此產(chǎn)生的新的化學性質(zhì)可用于量化或分離。
其目的就是提高目的物的可檢測性。把難于分析的物質(zhì)轉(zhuǎn)化為與其化學結(jié)構(gòu)相似但易于分析的物質(zhì),便于量化和分離。
對于GC來講,多數(shù)是為了增強目的物揮發(fā)生或者改善目的物極性;
對于HPLC來講多數(shù)是為了提高檢測器對目的物的響應。
簡單的說:它能幫你將不能分析的樣品通過衍生化試劑轉(zhuǎn)化為可分析的化合物。
判斷衍生化反應的指標
1、反應是否迅速、定量進行,反應重復性好壞,反應條件是否溫和,是否容易操作。
2、反應選擇性高,只于目標化合物反應。
3、衍生化產(chǎn)物只有一種,反應的副產(chǎn)物和過量的衍生化試劑應不干擾目標化合物的分離和檢測。
4、衍生化試劑通用性好,價謙易得。
衍生化分類:柱前衍生和柱后衍生
柱前衍生:是在經(jīng)過分析柱前使分析物與衍生劑反應,反應產(chǎn)物在分析柱上實現(xiàn)分離,實際分離的是衍生產(chǎn)物,檢測的也是衍生產(chǎn)物;
柱后衍生:是分離物在分析柱中實現(xiàn)分離后,在衍生池內(nèi)與衍生劑反應,在柱子中分離的是目的物,在檢測器處檢測的衍生產(chǎn)物。
柱前衍生雖然不存在反應動力學的限制,反應條件簡單,但是容易形成副產(chǎn)物,對色譜分離造成較大困難;在衍生化過程中,容易引入雜質(zhì)或干擾峰,或使樣品損失。柱后衍生形成副產(chǎn)物不重要,反應不需要完全;產(chǎn)物也不需要高的穩(wěn)定性,只需要有好的重復性即可;被分析物可以在其原有的形式下進行分離,容易選用已有的分析方法。
柱后衍生的主要特點為
1、快速且易于設置,只需連接一個來自色譜柱的入口,和一個進入檢測器的出口,安裝即刻完成;
2、模塊式設計,可選單或雙反應芯?赏瑫r進行加熱反應,常溫反應的兩步反應過程;
可選1臺、2臺或多臺衍生劑泵;
久經(jīng)考驗的自清洗泵,大大延長了其使用壽命。?內(nèi)置勻速器,大大降低了流速脈沖。?降低了接頭及管路連接,防止泄漏。?
全部連接接頭均位于前面板上,便于用戶使用。?
前面板顯示每種試劑的流速、壓力、設置溫度和實際溫度。?
泵的流速和反應溫度既可以通過前面板設置,也可以通過RS232進行設置。?可以設置壓力上下限,溫度限及系統(tǒng)待機延時。?
3、面板顯示,方便設置
反應器前面板顯示各反應芯的設置溫度和實際溫度;
衍生泵前面板顯示每種試劑的流速、壓力及壓力限;
4、外部控制
泵的流速等和反應器的溫度可以通過前面板控制,也可以通過RS232實現(xiàn)外部控制;
系統(tǒng)全PEEK流路。柱后衍生系統(tǒng)中的衍生化反應管溫度,因不同的衍生化反應原理而不同!∪鏞PA衍生法測定藥品中的牛磺酸含量及食品中;撬岬暮繙y定,衍生反應溫度60℃。伏格列波糖片的含量測定,衍生化反應溫度100℃。OPA衍生法測定氨甲酯類農(nóng)藥及殘留,衍生化反應溫度50℃。 碘化衍生法測定黃曲霉毒素含量,衍生化反應溫度70℃。 OPA衍生法測定氨基酸,衍生化反應溫度,45℃。 茚三酮衍生法測定氨基酸,衍生化反應溫度130℃。
GB/T 21164-2007( 蜂王漿中鏈霉素、雙氫鏈霉素殘留量測定液相色譜法)中衍生化反應溫度50℃。
NY/T 761-2008 (蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定)中氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定的水解溫度100℃,衍生化反應溫度室溫。不同的衍生化反應溫度室溫-130℃,就有不同的反應液進入紫外、熒光檢測器中,這樣的高溫度是會破壞紫外、熒光檢測器的流通池,故反應液必須降溫至室溫以下,如伏格列波糖片的含量測定、茚三酮衍生法測定氨基酸中,提出反應液降溫至15℃.這樣就必須在柱后衍生系統(tǒng)反應管后加一個冷卻系統(tǒng),將高溫度的反應液降至15℃,保證了紫外、熒光檢測器的安全使用,又保證了分析條件的一致性。
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