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色譜柱使用過程中出現(xiàn)的問題及解決方法匯總（湖南創(chuàng)特）
5 如何解決色譜柱使用過程中出現(xiàn)的問題 1.保留值與分離度重現(xiàn)性不好原因分析 問題 原因 表現(xiàn) 不同色譜柱間差異 填料、鍵合相不同 保留因子（k），分離因子（α） 使用期間柱變化 柱床破壞 柱效（N） 鍵合相丟失 保留因子（k），分離子（α） 硅膠基質(zhì)溶解 柱效（N） 強(qiáng)保留分堆積堵塞 保留因子（k），柱效（N） 柱外效應(yīng) 系統(tǒng)差異，進(jìn)樣量大、 柱效（N） 進(jìn)樣閥與 色譜柱之間、 色譜柱與檢測器之間管 路太長、檢測器流通池 體積大、接頭死體積大 等。 分離效果變差 流動(dòng)相組分改變 保留因子（k），柱效變化很小 流速改變 保留因子（k），分離因子（α） 溫度改變 保留因子（k），柱效變化很小 柱平衡慢 重新平衡時(shí)間不夠 保留因子（k），柱效變化很小 柱超載 樣品量太大 保留因子（k），柱效（N）
2.造成色譜峰（不對(duì)稱）拖尾的原因
1.色譜柱本身填裝問題，篩板堵塞或填料塌陷；
2.柱頭有污染；
3樣品超載；
4樣品溶劑不合適；
5.柱外效應(yīng)；
6化學(xué)或二次保留（硅羥基）效應(yīng)；
7緩沖容量不足或不合適；
8重金屬污染。
3.如何解決峰形拖尾的問題
A．與化學(xué)有關(guān)的拖尾問題
1．流動(dòng)相中，加入
知化合物加醋酸三乙胺；
2．如仍然拖尾，將三乙胺換為二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）；
3．降低進(jìn)樣量至<1ug。
B．與色譜柱有關(guān)的拖尾問題
1．如柱頭處有強(qiáng)保留的樣品組分積聚，反相柱可用20倍柱體積的96%的二碌甲烷與4%甲
醇，加1%氫氧化銨混合液沖洗，正向柱可用甲醇沖洗。
2．使用保護(hù)柱
C．與HPLC 系統(tǒng)有關(guān)的峰拖尾和峰加寬
1．進(jìn)樣體積過大，（通常≤25uL）；
2．進(jìn)樣閥與色譜柱及檢測器之間的管路體積過大（*佳連接管應(yīng)<
3．檢測器流通池的體積過大。
4．如何儲(chǔ)存色譜柱
1．防止緩沖溶液和水溶液流動(dòng)相產(chǎn)生微生物，做到流動(dòng)相用多少配多少，或在水流動(dòng)相中加200ppm的疊氮鈉以抑制細(xì)菌成長（一定當(dāng)心其毒性和潛在的爆炸性）；或在流動(dòng)相中加20%的有機(jī)改性劑，也可抑制微生物生長，有機(jī)改性劑還有助于流動(dòng)相脫氣。
2．盡可能將色譜柱貯存于100%有機(jī)溶劑（乙晴）中，避免在緩沖溶液中保存。
3．使用緩沖溶液后的色譜柱，應(yīng)用15～20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水—有機(jī)溶劑流動(dòng)相沖洗色譜柱，后換成100%有機(jī)溶劑儲(chǔ)存。
4．避免用純凈水沖洗鍵合致密的C18柱。
．將色譜柱的兩端用堵頭擰好，以免柱床填料干裂。
色譜柱使用過程中出現(xiàn)的問題及解決方法匯總（湖南創(chuàng)特）
湖南創(chuàng)特主營業(yè)務(wù)：
1、銷售本公司制造的色譜儀，以及進(jìn)口和國產(chǎn)的各類色譜儀、色譜儀配件、各種色譜柱、色譜標(biāo)樣及色譜試劑；兼營其他各種分析儀器、相關(guān)配件和試劑。
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