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技術(shù)文章
兔膠體金檢測(cè)技術(shù)IGSS法
兔膠體金檢測(cè)技術(shù)是用金屬離子和金屬蛋白復(fù)合物應(yīng)用免疫組化原理檢測(cè)組織內(nèi)抗原抗體的技術(shù),常用膠體金(鐵、汞等)重金屬離子。由于膠體金容易制成各種大小的顆粒且有很高的電子密度及分辨率,又不影響抗體的活性,因此既可用于免疫組化又適于免疫電鏡技術(shù)。
免疫金銀法(IGSS)操作流程
1、脫蠟至0.05mol/LTBSpH7.4緩沖液。
2、抗原修復(fù)。
3、1%卵蛋白(EA)15min,不洗。
4、特異性免疫抗體37℃120min或4℃20小時(shí)。
5、0.05MTBS洗后改0.02MTBS(0.1%BAS)洗10min。
6、1%卵蛋白(EA)15min,不洗。
7、PAG(1:15)(10nm)室溫孵育60min。
8、1%戊二醛10min;雙蒸水洗5min。
9、1%明膠洗5min;銀避光顯影8-15min;雙蒸水洗15min。
10、用固定液(15%硫酸鈉、20%硫代硫酸鈉混合液)固定5min。
11、1%戊二醛固定5min;溫水洗。
12、核固紅或甲基綠襯染,常規(guī)脫水封片。
結(jié)果:陽(yáng)性物質(zhì)呈黑色或黑褐色顆粒。
原創(chuàng)作者:生物科技有限公司001