六、后面板示意

1.聚能頭連接插座

2.腳踏開關(guān)連接插座

3.9針D形接口

其中：

針號       說明

1             保護(hù)信號輸入（低電平脈沖有效）

2             保護(hù)狀態(tài)解除（低電平脈沖有效）

3             空腳

4             可連接至頻率計(jì)數(shù)器

5             可連接至外部功率表（10毫伏輸出=1瓦特）

6             地線

7             此腳接地時(shí)為超聲波振蕩提供電路

8和9 在此兩個(gè)針腳接10K電位器可以遙控調(diào)節(jié)超聲波振蕩強(qiáng)度

4.電源插座

5.風(fēng)扇罩

注意：當(dāng)外接腳踏開關(guān)的電纜插頭插入后面板連接插座后，腳踏開關(guān)的通斷即與面板控制按鍵同時(shí)對粉碎儀的輸出進(jìn)行控制：欲使粉碎儀工作時(shí)，必須先以面板控制按鍵將設(shè)備調(diào)至需要的設(shè)置（定時(shí)長度、工作方式占空比）和有輸出狀態(tài)（“start/stop”指示燈亮）再踩壓腳踏開關(guān)，設(shè)備才有超聲輸出。若不需要腳踏控制，則必須將腳踏開關(guān)插頭由后面板的插座中拔出。

七、使用前的準(zhǔn)備工作

注意：如果把超聲波細(xì)胞粉碎儀長時(shí)間放在極冷或極熱的環(huán)境中，要等它達(dá)到室溫后才能進(jìn)行操作。

1.  確認(rèn)電源控制鈕置于OFF狀態(tài)。

2.  把電源線插進(jìn)電源插座。

3.  如換能用其它的變幅桿，請用隨機(jī)附帶的搬手和橡膠皮將聚能頭前的“Tip”頭擰下后再將所需的變幅桿擰緊到聚能頭上。

注意：不得把轉(zhuǎn)換器夾在臺鉗上裝配或者拆卸探頭。

4.  把轉(zhuǎn)換器、探頭組件安裝在實(shí)驗(yàn)室支架上，或是筒形消音罩中。

5.  把換能器電纜連接到電源連接單元上。

6.  如果使用選配件腳踏開關(guān)，把腳踏開關(guān)插頭插進(jìn)后面板的插座中，并確認(rèn)插頭完全插進(jìn)了插座。

（圖三） 鈦合金聚能桿及變幅桿

八、操作建議和技術(shù)

破碎細(xì)胞

單細(xì)胞有機(jī)體（微生物）含有半透性堅(jiān)韌的細(xì)胞外壁，包圍原漿（細(xì)胞）膜和細(xì)胞質(zhì)。細(xì)胞質(zhì)由核酸、蛋白、碳水化合物、脂質(zhì)、酶、有機(jī)離子、維生素、色素、包涵體，以及80%的水組成。要從細(xì)胞內(nèi)分離和提取任何這些成分，必須破碎細(xì)胞壁和原漿膜。有時(shí)細(xì)胞可以分泌出所需要的物質(zhì)，但是在多數(shù)情況下，必須用超聲波破碎細(xì)胞壁才可以放出這些物質(zhì)。

     微生物對超聲波分解的靈敏度差別較大。例如，*容易分解的是桿狀微生物（桿菌），而球形微生物（球菌）要難于分解得多。分枝桿菌屬特別難于破碎的菌種，結(jié)核菌就是其中一種。一般地說，動物細(xì)胞比植物細(xì)胞易于破碎，紅血球比肌細(xì)胞要易于破碎得多，因?yàn)榧t細(xì)胞沒有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁。在進(jìn)行超聲波處理時(shí)，樣品中的分子運(yùn)動一般會引起溫度上升，特別是在容積較小的情況下溫度上升更快。因?yàn)楦邷赜绊懣栈M(jìn)程的進(jìn)行，所以應(yīng)當(dāng)盡可能保持樣品在低溫下處理，是在接近冰點(diǎn)的溫度下進(jìn)行破碎，比如可以通過把樣品浸入在冰鹽水浴中進(jìn)行破碎，還可通過使用脈沖超聲波處理，也就是說主樣品承受幾個(gè)瞬時(shí)的超聲波簇，從而減緩溫度的上升。

還可以通過增加液壓（一般來說15~60psi）和增加粘度的方法促進(jìn)細(xì)胞破碎。處理微生物時(shí)，加入0.05至0.5毫米直徑的玻璃珠，由于集中空化釋放的能量和物理碾壓作用，可以促進(jìn)細(xì)胞破碎。在破碎孢子和酵母菌時(shí)，玻璃珠幾乎是不可缺少的。推薦的比例是一個(gè)體積玻璃珠，兩個(gè)體積液體。

在處理難破碎的細(xì)胞時(shí)用溶菌酶之類的酶進(jìn)行預(yù)處理比較好，比如用蝸牛酶預(yù)處理酵母、溶葡球菌酶預(yù)處理葡萄球菌、膠原蛋白酶預(yù)處理皮膚和軟骨，透明酯酸胰蛋白酶預(yù)處理肝和腎。

如果不能夠使用酶，可以考慮以下的處理過程：在-70℃把樣品冷凍過夜，在進(jìn)行超聲波破碎前溶成冰水；應(yīng)當(dāng)盡可能把組織切得非常細(xì)小使之能夠在水中移動；皮膚及肌肉之類的堅(jiān)韌組織應(yīng)當(dāng)先用攪切機(jī)之類的儀器均漿處理10秒鐘，并且在超聲波處理時(shí)封閉裝在小容器中，如果對實(shí)驗(yàn)沒有影響，也可以采用冷凍后再磨碎的方法；如果希望不破壞亞細(xì)胞顆粒，應(yīng)當(dāng)把震幅設(shè)置得較低，而處理時(shí)間作相應(yīng)的延長。

降低氣溶現(xiàn)象

把探頭插至樣品表面以下足夠深處，以抑制氣溶現(xiàn)象或者發(fā)泡現(xiàn)象。發(fā)泡可能會嚴(yán)重地降低空化作用并且可造成蛋白質(zhì)變性。在低功率下對樣品進(jìn)行處理、沒有起泡現(xiàn)象發(fā)生，其效果比在高功率下處理、有起泡現(xiàn)象好得多。降低功率、延長時(shí)間，使用較小的容器以及降低液體的溫度一般可以防止氣溶現(xiàn)象和發(fā)泡現(xiàn)象。不要使用抗泡沫劑或者表面活性劑。

在空化時(shí)會形成自由基。如果任其積累，自由基會與蛋白質(zhì)、多糖及核酸反應(yīng)而破壞樣品中的成分。盡管在較短的處理時(shí)間下自由基的形成一般對樣品不會造成很大影響，但如果準(zhǔn)備長時(shí)間對樣品進(jìn)行處理，添加某些自由基清除物，諸如N20、半胱氨酸、還原氨酸、還原谷胱甘肽、二硫蘇糖醇或者其它SH之類的化合物，是有益的。用氦氣及氫氣之類的氣體進(jìn)行保護(hù)或者在樣品中投入小塊干冰一般會抑制自由基的形成。

容器的選擇

因?yàn)槟芰酷尫琶芏鹊那闆r剛好發(fā)生在探頭下面，所以應(yīng)當(dāng)把樣品盡可能地靠近端頭。自由運(yùn)動的細(xì)胞反復(fù)地在探頭下面循環(huán)，以達(dá)到的處理效果。由于固體易于被超聲波排開，破碎固體顆粒時(shí)，應(yīng)當(dāng)把探頭放在與其直徑相適應(yīng)的容器中，較小的容器可以限制固體顆粒的移動。處理小體積的樣品推薦使用圓錐形試管。盡管塑料試管可以使用，但是不銹鋼試管比塑料試管更加有效，因?yàn)樗鼈儾晃照駝幽芰俊?span lang="EN-US">

如果探頭與容器接觸會使輸出功率損失，并使細(xì)微的玻璃粒進(jìn)入液體中。雖然這些玻璃粒不會對樣品的化學(xué)成分產(chǎn)生影響，但是在離心時(shí)會形成薄薄的灰色雜質(zhì)層。如果探頭必須與固體樣品接觸，請使用不銹鋼試管。微型Tip只能與液體接觸，不得與其它物體接觸，因?yàn)樵诮佑|點(diǎn)產(chǎn)生的應(yīng)力會引起微型Tip破裂。雖然直徑較大的探頭與容器接觸時(shí)不會破裂，但是會造成容器破裂。

在每次使用前，把探頭或微型Tip放在水（或者酒精）中，接通電源數(shù)秒，以去除殘余物。

預(yù)防粘連現(xiàn)象

為防止粘連現(xiàn)象發(fā)生，可采用硅處理方法處理試管：徹底清洗和干燥試管，涂復(fù)硅酮，然后風(fēng)干。探頭或變幅桿可以浸入開水中消毒，或用滅菌劑消毒。

高粘度和高濃度的溶液進(jìn)行破碎會比較困難。5,000CPS和15%的濃度一般為破碎極限。如果樣品濃稠得不易傾倒或者不易流動，就不適于用超聲波處理。

九、設(shè)備返修

我們建儀把需要修理的超聲波細(xì)胞粉碎儀送回原廠。為了得到及時(shí)的服務(wù)，請?jiān)谒突貎x器前與工廠聯(lián)系。信中請注明購買日期、型號和系列號。保修之外的機(jī)器，應(yīng)當(dāng)提交定單以免不必要的延誤。仔細(xì)包裝以免運(yùn)輸途中損壞。

原創(chuàng)作者：天津奧特賽恩斯儀器有限公司