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技術(shù)文章
選擇凝膠的方法
點擊次數(shù)：448 發(fā)布時間：2011/4/15 16:16:54
上海勁馬生物科技有限公司專業(yè)經(jīng)營生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品，致力于向國內(nèi)生命科學(xué)研究人員提供一流的產(chǎn)品和服務(wù)。
1.測定－－－－－－分子量、PI
當目標蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚時，可用PAGE電泳方法或?qū)游龇椒右詼y定。分離范圍廣闊的Superose HR預(yù)裝柱很適合測定未知蛋白的分子量。用少量離子交換介質(zhì)在多個含不同PH緩沖液的試管中，可簡易地測出PI，并選擇純化用緩沖液的*佳PH。
2.選擇－－－－－－層析方法
若對目標蛋白的特性或樣品成分不太了解，可嘗試幾種不同的純化方法：
一] 使用*通用的凝膠過濾方法，選擇分離范圍廣闊的介質(zhì)如Superose、Sephacryl HR依據(jù)分子量將樣品分成不同組份。
二] 用含專一配體或抗體的親和層析介質(zhì)結(jié)合目標蛋白。亦可用各種活化偶聯(lián)介質(zhì)偶聯(lián)目標蛋白的底物、受體等自制親和介質(zhì)，再用以結(jié)合目標蛋白。一步即可得到高純度樣品。
三] 體積大的樣品，往往使用離子交換層析加以濃縮及粗純化。高鹽洗脫的樣品，可再用疏水層析純化。疏水層析利用高鹽吸附、低鹽洗脫的原理，洗脫樣品又可直接上離子交換等吸附性層析。兩種方法常被交替使用于純化流程中。
3.純化－－－－－－大量粗品
處理大量原液時，為避免堵塞柱子，一般使用sepharose big beads、sepharoseXL、sepharose fast flow等大顆粒離子交換介質(zhì)。擴張柱床吸附技術(shù)利用多種STREAMLINE介質(zhì)，直接從含破碎細胞或組織萃取物的發(fā)酵液中俘獲蛋白。將離心、超濾、初純化結(jié)合為一。提高回收率，縮短純化周期。
上海勁馬生物科技主營產(chǎn)品：ELISA試劑盒,檢測試劑盒,分子生物學(xué)試劑盒,生物診斷試劑盒,金標檢測試劑盒,放免試劑盒,生物試劑,胎牛血清,各類動物血清,各種抗體,實驗儀器。
原創(chuàng)作者：杭州旺森科技有限公司
