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ELISA試劑盒的深淺進(jìn)行定性或定量分析

點擊次數(shù):381 發(fā)布時間:2017/12/15 9:58:34
ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。結(jié)合在固相載體外表的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶符號的抗原或抗體既保存其免疫學(xué)活性,又保存酶的活性。ELISA試劑盒在測定時,受檢標(biāo)本(測定其間的抗體或抗原)與固相載體外表的抗原或抗體起反響。
用洗刷的辦法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分隔。再參加酶符號的抗原或抗體,也經(jīng)過反響而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈必定的份額。參加酶反響的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)品,產(chǎn)品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色。
使用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人可溶性粘附分ELISA試劑盒水平。用純化的人可溶性粘附分ELISA試劑盒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次參加可溶性粘附分ELISA試劑盒,再與HRP符號的可溶性粘附分ELISA試劑盒抗體結(jié)合,構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過完全洗刷后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終究的黃色。色彩的深淺和樣品中的可溶性粘附分ELISA試劑盒呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),經(jīng)過規(guī)范曲線核算樣品中人可溶性粘附分濃度。
 

原創(chuàng)作者:上海紀(jì)寧實業(yè)有限公司

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