多年來，研究人員一直采用傷口愈合試驗(yàn)來研究細(xì)胞化、組織基質(zhì)重塑，或估計(jì)不同細(xì)胞和培養(yǎng)物的細(xì)胞增殖和遷移率條件傷口愈合試驗(yàn)已用于研究細(xì)胞性和肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)通過Rho家族GTP酶、微管和高爾基體定向的作用p53在細(xì)胞遷移以及其他生理過程中的作用。這些分析通常涉及培養(yǎng)融合細(xì)胞單層，然后通過刮擦線穿過單層。然后用顯微鏡檢查該“傷口”產(chǎn)生的開口間隙隨著時(shí)間的推移，細(xì)胞移動(dòng)并填充受損區(qū)域。這種“治愈”效果可能需要幾個(gè)小時(shí)這取決于細(xì)胞類型、條件和“受傷”區(qū)域的表面積。

這些“劃痕”試驗(yàn)的缺點(diǎn)是缺乏明確的傷口表面積或間隙細(xì)胞之間。這些傷口的大小和寬度各不相同，這阻礙了一致的結(jié)果和產(chǎn)生井與井之間的差異。此外，“劃痕”試驗(yàn)通常會(huì)對(duì)皮膚造成損傷這可以防止細(xì)胞遷移到傷口部位并愈合。

艾美捷 24孔細(xì)胞劃痕試驗(yàn)試劑盒通過提供有的可以產(chǎn)生限定的傷口場(chǎng)或間隙的經(jīng)處理的插入物。培養(yǎng)細(xì)胞直至形成插入物周圍的單層。移除插入物，留下精確的0.9 mm開放“傷口區(qū)域”在細(xì)胞之間。此時(shí)可對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理并監(jiān)測(cè)其遷移和增殖傷口區(qū)域。這些事件的進(jìn)展可以通過固定在特定時(shí)間點(diǎn)或延時(shí)顯微鏡。

艾美捷 24孔細(xì)胞劃痕試驗(yàn)試劑盒組分：

1.24孔傷口愈合測(cè)定板（零件號(hào)112001）：兩個(gè)24孔板，包含12個(gè)傷口

字段插入每個(gè)（參見下圖）

2.細(xì)胞染色液（零件號(hào)11002）：一瓶10mL

3.DAPI熒光染色（1000X）（零件號(hào)112002）：一個(gè)30µL小瓶

4.固定溶液（零件號(hào)122402）：一個(gè)20mL瓶

艾美捷 24孔細(xì)胞劃痕試驗(yàn)試劑盒檢測(cè)原理：

細(xì)胞選擇™ 24孔傷口愈合分析試劑盒包含2 x 24孔板，每個(gè)板包含12利處理塑料插件。插入物形成一個(gè)傷口區(qū)域，其定義間隙為0.9mm測(cè)量細(xì)胞的遷移和增殖速率。遷移細(xì)胞能夠延伸突起并終侵入并閉合傷口區(qū)域。細(xì)胞增殖和遷移速率可以是使用手動(dòng)定影和顯微成像確定。提供用于停止的固定解決方案細(xì)胞在特定時(shí)間點(diǎn)。還提供了細(xì)胞染色和DAPI染色，以便用光觀察結(jié)果和熒光顯微鏡。

文獻(xiàn)參考：

1. Ridley AJ, Schwartz MA, Burridge K, Firtel RA, Ginsberg MH, Borisy G, Parsons JT, Horwitz

AR. (2003) Science 302, 1704-9.

2. Horwitz R, Webb D. (2003) Curr Biol. 13, R756-9.

3. Lauffenburger DA, Horwitz AF. (1996) Cell 84, 359-369.

來源：https://www.amyjet.com/products/CBA-120.shtml